大肠杆菌高密度培养过程中OD下降,后来又生长起来的原因???


最近在做大肠杆菌高密度发酵500L上罐时,到7-8h时,OD从3掉到零点几,溶氧上升,发酵液少量起泡,做过噬菌斑实验并没有看到噬菌斑,测过糖浓度,大概还有20g/L,镜检发现大部分菌体自溶为碎片,少量菌体存活,形态与之前相比有所改变。在100L发酵罐进行了重复,居然发生同500L一样的现象,连着两罐都是这样。100L发酵罐运行过夜后,第二天又发现菌体长了起来,溶氧掉零时间维持较长,PH上升,就进行了放罐。又继续在50L小罐进行了发酵,发现虽然OD涨到了20,但还是没有逃掉自溶的命运,培养8-9h后,DO 上升,菌体自溶,离心后发酵液不清。将此状态培养16h后,又发生DO下降,OD升高,菌体生长起来的现象,后期进行了正常的补糖和诱导,但发现整体菌体生长趋势明显下降,产量也没有之前发酵的高,42h出现染芽孢现象。请问哪位大侠在做大肠杆菌高密度发酵的时候有没有遇到这种现象,这是什么原因造成的,还请赐教….
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科学蛀虫

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溶菌有两种:噬菌体溶菌以及工艺性溶菌。
用平板法检测噬菌体,检出有一定的概率,根据我的经验,这个概率小于40%。就是说,就算罐里面有噬菌体,也是有可能检不到,因为噬菌体不爆发,而不形成噬菌斑。
另外你取无菌样的时候,也有可能取样管温度过高,烫死了。

工艺性溶菌的原因就比较多了,各类离子不足,碳氮比不合适等

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